1,酵母菌的培養(yǎng)條件
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2,白酒生產(chǎn)酵母擴大培養(yǎng)怎樣做
原料配方凡含有淀粉和糖類的原料均可釀制白酒,但不同的原料釀制出的白酒風(fēng)味各不相同。糧食類的高粱、玉米、大麥;薯類的甘薯、木薯;含糖原料甘蔗及甜菜的渣、廢糖蜜等均可制酒。此外,高粱糠、米糠、麩皮、淘米水、淀粉渣、甘薯拐子、甜菜頭尾等,均可作為代用原料。野生植物,如橡子、菊芋、杜梨、金櫻子等,也可作為代用原料。我國傳統(tǒng)的白酒釀造工藝為固態(tài)發(fā)酵法,在發(fā)酵時需添加一些輔料,以調(diào)整淀粉濃度,保持酒醅的松軟度,保持漿水。常用的輔料有稻殼、谷糠、玉米芯、高粱殼、花生皮等。酒曲、酒母 除了原料和輔料之外,還需要有酒曲。以淀粉原料生產(chǎn)白酒時,淀粉需要經(jīng)過多種淀粉酶的水解作用,生成可以進行發(fā)酵的糖,這樣才能為酵母所利用,這一過程稱之為糖化,所用的糖化劑稱為曲(或酒曲、糖化曲)。曲是以含淀粉為主的原料做培養(yǎng)基,培養(yǎng)多種霉菌,積累大量淀粉酶,是一種粗制的酶制劑。目前常用的糖化曲有大曲(生產(chǎn)名酒、優(yōu)質(zhì)酒用),小曲(生產(chǎn)小曲酒用)和麩曲(生產(chǎn)麩曲白酒用)。生產(chǎn)中使用最廣的是麩曲。此外,糖被酵母菌分泌的酒化酶作用,轉(zhuǎn)化為酒精等物質(zhì),即稱之為酒精發(fā)酵,這一過程所用的發(fā)酵劑稱為酒母。酒母是以含糖物質(zhì)為培養(yǎng)基,將酵母菌經(jīng)過相當(dāng)純粹的擴大培養(yǎng),所得的酵母菌增殖培養(yǎng)液。生產(chǎn)上多用大缸酒母。{1}
3,釀酒酵母是怎樣培出來的
酵母菌的分離純化一、實驗原理 酵母菌常見于含糖份比較高的環(huán)境中,如果園土果皮等的表面。多數(shù)酵母菌喜歡偏酸條件,最適pH為4.5-6.0.酵母菌生長迅速,容易分離培養(yǎng)。在液體培養(yǎng)基中,酵母菌比霉菌生長快,利用酸性條件則可以抑制細(xì)菌的生長。因此常用酸性液體培養(yǎng)基獲得酵母菌的加富培養(yǎng),然后在固體培養(yǎng)基上劃線分離純化。二、器材和用品 1、蘋果皮、葡萄皮、果園土等。 2、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基: 3、無菌吸管、無菌培養(yǎng)皿、100ml無菌水1瓶/組、涂棒、美蘭染液、顯微鏡、接種環(huán)等。 三、實驗方法 1、接種:取果皮(不需沖洗)或土壤5克,加入到100ml無菌水中,充分?jǐn)嚢韬?,用無菌吸管取1ml接入到9ml乳酸馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液中,在28-30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,可見培養(yǎng)液變渾濁。 2、加富培養(yǎng):用無菌吸管取上述培養(yǎng)液1ml,注入另1管乳酸馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液中,在28-30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。 3、鏡檢:用無菌操作法用接種環(huán)取少量菌液置于載玻片上,中央滴一滴美蘭染液,混合均勻后制成水浸片,在高倍鏡下觀察酵母菌的形態(tài)及出芽方,并可根據(jù)菌體是否.染色來區(qū)分酵母菌的死活細(xì)胞,因活細(xì)胞使美蘭染液液還原,故菌體不著色., 4、涂皿:用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基溶化后制成平板,用無菌吸管取0.1ml加富培養(yǎng)液到平板中,用涂棒涂勻后培養(yǎng)24h。 5、分離純化:用接種環(huán)挑取單個酵母菌菌落,在平板上四區(qū)劃線,培養(yǎng)后分離得到單個菌落。 6、鏡檢:挑取單菌落,制片觀察其形態(tài)。 7、菌種保藏:接種酵母菌到馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基上,長出菌苔后冰箱保藏培養(yǎng)基制備 (一)YPD培養(yǎng)基 YPD 或YPED,又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基,加入瓊脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)瓊脂培養(yǎng)基 用于酵母菌的培養(yǎng) 配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固體培養(yǎng)基,加入2%瓊脂粉 配制方法: 1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉 2 高壓 121度 20min 3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液滅菌后加入)(二)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制 1、培養(yǎng)基成分 馬鈴薯 20g 葡萄糖 2 g 瓊脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2.配制方法 (1)配制20%馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000m1。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存?zhèn)溆谩? (2)配制時,按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續(xù)加熱融化并補足失水。 (3)分裝、加塞、包扎。 (4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 m{2}