內(nèi)參為什么比茅臺好，電極中為什么要加內(nèi)參比溶液啊直接用惰性金屬作電極不好么 搜

沒看懂什么意思？

用于正負(fù)電極電荷流通阿

我不同意樓上的說法，并不是說只有茅臺才用糧食釀造，食用酒精也是糧食釀造的。那為什么說茅臺好呢，那是因?yàn)槊┡_是國酒，彰顯身份，所以大家就說好。其實(shí)論口感，茅臺并不一定就比五娘液、汾酒等好喝，尤其是茅臺的味道，苦、酸和曲味尤為突出，并不是每個(gè)人都能接受（當(dāng)然很多人喝的時(shí)候一口悶，也不知道喝的什么味）。反而像五糧液和汾酒等非醬香型白酒，入口還顯得甘甜順暢。所以茅臺好不好，見仁見智。

內(nèi)參一般情況下的定義是正常樣品中本來就有的相對更為穩(wěn)定存在分子。 所以，你做好實(shí)驗(yàn)的“陽性對照”、“陰性對照”，然后保持與“試驗(yàn)處理樣品”同樣的樣品上樣量，再然后對pvdf膜進(jìn)行剪切以及分別的抗體（內(nèi)參抗體、目標(biāo)蛋白的特異性抗體）孵育就可。。

首先內(nèi)參酒的名字非常有說辭。酒鬼酒的產(chǎn)地是湖南的湘西地區(qū)，這里風(fēng)景秀麗，民風(fēng)淳樸，內(nèi)參酒便是在畫家黃永玉的畫中誕生的。別具一格的酒鬼酒瓶，得到大家的高度贊許，取名“內(nèi)參”，意為“少數(shù)人看的，數(shù)量有限”。從此也奠定的內(nèi)參酒的整體基調(diào)，有內(nèi)涵，少宣傳，定量生產(chǎn)，限量銷售，高價(jià)值高價(jià)格。價(jià)格取決于價(jià)值，內(nèi)參酒深厚的文化底蘊(yùn)和自身完美的酒質(zhì)，雖是單瓶千元以上的價(jià)格，但依然獲得消費(fèi)者的高度認(rèn)可。也側(cè)面體現(xiàn)了消費(fèi)者對白酒的追求將走向更高端，多元化，文化屬性成為白酒的核心價(jià)值。好酒應(yīng)具備兩個(gè)特征：品質(zhì)及風(fēng)味的特色，這是酒行業(yè)永遠(yuǎn)的話題，馥郁香型酒鬼內(nèi)參酒具備這兩個(gè)特征，在融合和創(chuàng)新方面走在了前列?！耙豢谌恪倍甲龅讲蝗菀祝龅狡胶?、協(xié)調(diào)更難，酒鬼內(nèi)參酒給消費(fèi)者的感官體驗(yàn)非常好。在湘西地帶，鬼就是一種神秘力量的代表，表示著一種人與山水對話、與自然融合的精神狀態(tài)，與其說酒鬼酒是一種上好的飲品，還不如說酒鬼酒是一種藝術(shù)精品，它的酒瓶設(shè)計(jì)獨(dú)特，粗麻布袋裝著酒鬼酒，當(dāng)然酒鬼酒內(nèi)參酒也是一樣，有著跟酒鬼酒一樣的特質(zhì)，口感上大致相同。 （推薦閱讀；“葵花牌”茅臺酒為什么收藏價(jià)值那么高）在湘西地帶，鬼就是一種神秘力量的代表，表示著一種人與山水對話、與自然融合的精神狀態(tài)，與其說酒鬼酒是一種上好的飲品，還不如說酒鬼酒是一種藝術(shù)精品，它的酒瓶設(shè)計(jì)獨(dú)特，粗麻布袋裝著酒鬼酒，當(dāng)然酒鬼酒內(nèi)參酒也是一樣，有著跟酒鬼酒一樣的特質(zhì)，口感上大致相同。 （推薦閱讀；“葵花牌”茅臺酒為什么收藏價(jià)值那么高）。

我也在用網(wǎng)易音樂，界面簡潔高大上，歌詞比較全，音樂也比較全，可以簽到領(lǐng)積分。網(wǎng)易云音樂是一款專注于發(fā)現(xiàn)與分享的音樂產(chǎn)品，依托專業(yè)音樂人、DJ、好友推薦及社交功能，在線音樂服務(wù)主打歌單、社交、大牌推薦和音樂指紋，以歌單、DJ節(jié)目、社交、地理位置為核心要素，主打發(fā)現(xiàn)和分享。

網(wǎng)易音樂上的新歌多，能在第一時(shí)間更新，但也大部分人在用酷狗，根據(jù)個(gè)人愛好

你們說酒鬼酒和茅臺哪個(gè)好喝啊2018-06-19 17:02你們說酒鬼酒和茅臺哪個(gè)好喝?。款I(lǐng)導(dǎo)要過生日了，我準(zhǔn)備買點(diǎn)禮物去，我知道他喜歡喝酒，我在想買茅臺還是酒鬼酒，你們說呢？1 2 下一頁網(wǎng)友微論請點(diǎn)擊輸入圖片描述其實(shí)最大的原因就是因?yàn)槠洫?dú)特的香型——馥郁香，酒鬼酒的香型打破了中國四大傳統(tǒng)香型，獨(dú)樹一幟請點(diǎn)擊輸入圖片描述酒鬼酒榮獲“2012年度華樽杯中國洞藏白酒品牌價(jià)值第一名、中國酒類十大最具價(jià)值品牌”兩項(xiàng)全國大獎(jiǎng)。酒鬼酒和茅臺酒各有千秋，不過個(gè)人覺得酒鬼酒更好一點(diǎn)，兩種酒我都喝酒，我覺得酒鬼酒的口感更加低調(diào)奢華，味道也更好。最佳案酒鬼酒是來自湖南湘西的一款中高端白酒，有他獨(dú)有的香型馥郁香型，口感綿甜，香味濃郁。具有前濃中清后醬的獨(dú)特口感，是一款值得一品的酒。：喝了才知道，不過西南地區(qū)的酒是不錯(cuò)www.ledlongtech.com：瀘州老窖三人炫52度1000ml酒仙***價(jià)白酒2斤裝特價(jià)：￥139.002309個(gè)好評京東配送立即搶購茅臺鎮(zhèn)白酒醬香型自釀原漿收藏老酒500ml國產(chǎn)酒產(chǎn)自貴州老窖特價(jià)：￥49問題說明： 哪個(gè)是正宗的？最佳案看你平常喝什么酒，一般來說，口感醇香，酒精度數(shù)偏高，有點(diǎn)燒灼感，最佳案50度酒鬼酒口感不錯(cuò)，我家日常喜歡喝點(diǎn)白酒，這個(gè)50度酒鬼酒真的是我家中常備的一款了！味道濃而不烈，前濃、中清、后醬，一口能嘗三香！茯苓水解酒酒鬼酒陶瓶的設(shè)計(jì)立意孤絕，妙手天成，平樸里顯功力，隨意中見灑脫，古拙最佳案酒鬼酒是馥郁香型的典型代表。就中國目前的白酒市場來說，酒鬼酒也是唯一一款馥郁香的酒。首先，你拿起酒來，首聞濃香，入口清香順滑，喝完留有醬香。杯子的香氣最佳案酒鬼酒主銷產(chǎn)品，洞藏收藏版、紀(jì)念版，內(nèi)參酒、封壇20年、15年、10年，酒鬼52度、酒鬼50度，你說的標(biāo)準(zhǔn)酒應(yīng)該是52度酒鬼，黃色的麻袋瓶，標(biāo)準(zhǔn)度數(shù)。最佳案50度酒鬼酒的口感，入口醇厚，口感綿純，嘴里回香，確實(shí)是好酒。最佳案零售價(jià)1080元/瓶最佳案不知道你在那里看到的，酒鬼有內(nèi)參酒，賣1000多。但沒聽說過大內(nèi)參有酒鬼封印酒，12年的封壇酒，好像賣400多，貌似挺好喝的。典藏什么銀點(diǎn)是聽都沒聽說過

看這名字……或許冷凝式熱水器可以把熱水變涼吧

是貴了1點(diǎn)，我個(gè)人不會去買吧，熱水器能燒熱水就好了

從它的名字入手，冷凝式，也就是對熱水器煙氣進(jìn)行冷凝，然后煙氣會放出潛熱，這些 熱量又可以被熱水器再次利用，比較節(jié)儉能源。多了這么1步，技術(shù)、設(shè)備、設(shè)計(jì)本錢 甚么的加1塊兒，價(jià)格自然比1般的要高了。能率、林內(nèi)、萬和甚么的都有出這產(chǎn)品。 林內(nèi)的冷凝式熱水器是參加節(jié)能惠民工程的，其他牌子就不清楚了

酒的名稱起內(nèi)參酒、摘要酒，我認(rèn)為純粹是生產(chǎn)酒的公司搞噱頭。摘要酒的生產(chǎn)企業(yè)是民營企業(yè)，這里就不說它了，它愛咋起名就咋起名。內(nèi)參酒的生產(chǎn)企業(yè)是中糧集團(tuán)參股的公司，是國資背景的用的是公家的錢，我在這里說道說道： [呲牙]內(nèi)參酒的噱頭是是“品內(nèi)參，知大事”，還生搬硬套的扯上中國傳統(tǒng)文化，它那酒喝多了的董事長扯出個(gè)“內(nèi)斂乾坤，參悟天地”的酒文化，還可笑的扯出這個(gè)內(nèi)參酒的內(nèi)涵價(jià)值，所謂的“三觀”（“世界觀、人生觀、價(jià)值觀”）。說什么內(nèi)參酒代表的是“尊崇自然，天人合一”的世界觀，更可笑的是把它的酒說成是承載了“豪邁、進(jìn)取、兼善、包容、樂觀、積極”的人生觀。這家酒業(yè)公司的董事長估計(jì)是經(jīng)常喝到酒醉才會有如此神想啊，不輸酒仙李白更不輸寫出《飲酒》組詩的陶公??！ 迎合對大內(nèi)的神秘感和崇拜心理 內(nèi)參和摘要是官場上使用的詞，對小老百姓而言，顯得神秘而又令人向往。所以。酒起上這樣的名字，給人的感覺就是現(xiàn)在的官場就是在喝這樣的酒。那咱作為老百姓，雖然進(jìn)不了人家的圈子，那喝一喝人家喝的酒，那感覺也是賊有面子，心里賊拉爽啊。就像茅臺一樣，國酒茅臺，真正喝的估計(jì)都是些官場里呼風(fēng)喚雨的人物。那老百姓要是喝上一次，是不是也能找到呼風(fēng)喚雨的感覺啊。所以，喝酒不光是品質(zhì)，叫什么名字也很重要的。 金沙酒業(yè)的摘要酒可是高端貨！喝過一次！ 裝逼啊 想靠上特權(quán)的邊而已。你覺得很尷尬，但人家居然能賣。有人掏錢買，你有什么辦法？ 提升酒的檔次，迎合一部分人的喜好，再把價(jià)位定的高高的，儼然一副高檔酒的樣子，吸引更多的消費(fèi)者掏腰包夠買，來賺取更高的利潤！ 現(xiàn)在很多酒的酒質(zhì)沒提升多少，包裝卻是越來越精美，價(jià)位也是越來越高，尤其是近兩年，不但白酒股票漲了，白酒的零售價(jià)也漲的不少，就拿黃蓋53汾，前面我還能買到35的價(jià)格，今年沒有45想都別想了。 希望酒廠別一直在名稱包裝上下功夫，也把酒質(zhì)提升提升！ 就像五糧液前身，叫雜糧酒。相對來說還是五糧液比較好聽首先，酒是中國傳統(tǒng)文化中很重要的組成部分。酒文化一定程度上是 社會 文化生活的縮影。在現(xiàn)實(shí)生活中，酒是一種 情感 交流，商務(wù)往來，政務(wù)招待的重要媒介。對于老百姓來講，酒更多的是一種抒發(fā)感情，招待親友的，點(diǎn)綴生活的催化劑。 其次，中國酒文化博大精深。酒的種類多，風(fēng)味豐富。以茅臺為首的高端白酒已經(jīng)脫離了酒的本真，化作階層和身份的象征，更是一種回報(bào)率很高不錯(cuò)的投資工具。 最后，回到問題。內(nèi)參，摘要這些詞匯滲透著行政官方，稀有，高級，神秘的寓意，意為權(quán)利機(jī)構(gòu)上層才能接觸，使用。在老百姓看來，官方上層用的東西必定是好的。所以，酒廠充分運(yùn)用消費(fèi)者獵奇心理，把酒（高低端都包括）以內(nèi)參，摘要，特供等詞匯包裝和宣傳，以提升價(jià)格，滿足市場需要，獲得更多利潤。當(dāng)然，這些酒的品質(zhì)有些還是不錯(cuò)的。您的這個(gè)問題有意思不放探討一下！酒的名稱跟人起名字有相同之處，一個(gè)朗朗上口又有寓意的名字往往能成就一個(gè)人的人生。 酒廠給自己的品牌酒水起名字就像老父親給孩子起名字時(shí)的心情一樣，比如茅臺酒廠的飛天茅臺酒如其名一飛沖天。內(nèi)參、摘要、紅星二鍋頭等等名字的寓意也已經(jīng)很直白，通過名字展示產(chǎn)品的“逼格兒”展現(xiàn)酒水的價(jià)值。

喝酒喝醉了就什么都不知道啦，什么傷心啊，難過啊都不知道。抽煙呢可以麻痹自己，有句話不是這么說嘛，抽煙傷肺不傷心嘛，哈哈

借助煙酒來麻醉自己

可能是那樣能抹去心里的空虛吧！雖然對身體不好，但是這樣有很多人去做，最好的辦法我覺得是不停找事情做

鎮(zhèn)痛作用

失戀并不可怕，很多人喜歡用煙酒來解憂愁，有的甚至舉杯消愁愁更愁。不妨參加些有意義的活動(dòng)轉(zhuǎn)移注意力，說不定在這過程中能邂逅另外一段浪漫的感情呀。祝你好運(yùn)

一、瀘州老窖·國窖1573國窖這個(gè)酒是千元必買系列，在濃香酒里應(yīng)該屬于老二吧，一直被五糧液壓制，只不過這兩年上串的勢頭比較猛，以往這個(gè)酒800左右，現(xiàn)在一千以下已經(jīng)很難買到。其實(shí)不得不佩服瀘州老窖的匠人之心，現(xiàn)在很多濃香酒都使用多糧釀造，但它依然使用單糧釀造，即原料里只有高粱，其實(shí)單糧比起多糧來說是吃虧的，至少比起香氣豐富度來說。但匠心貫徹到底，把單糧釀造做到極致也能立足頂級白酒行列。品評沒有參照物對比，很難突出一個(gè)酒的優(yōu)缺點(diǎn)，就拿五糧液來說，國窖體現(xiàn)的風(fēng)格是綿甜爽凈，窖香突出，比起五糧液來說香氣單調(diào)，缺少幽雅感，其次回甘明顯，是國窖優(yōu)于五糧液的地方。品質(zhì)不相上下，一個(gè)純粹，一個(gè)風(fēng)騷，看你喜歡哪個(gè)。二、貴州茅臺·飛天茅臺43度千元價(jià)格帶的佼佼者，無論送禮，還是自飲都是非常好的選擇，性價(jià)比非常高。53度茅臺已經(jīng)封神，全民追捧的對象，但對于43度茅臺來說，這并不是完全跨不過去的坎，尤其是53度漲超接近一倍的價(jià)格，43度茅臺更顯性價(jià)比，無非就是淡了一點(diǎn)而已。三、洋河·夢之藍(lán)M9口感極為柔順，讓我想起德芙的廣告詞，縱享絲滑，入口之后，純凈的窖底多糧香持續(xù)散發(fā)，如少女般含羞動(dòng)人，就是講究一個(gè)柔。如果平時(shí)有特別好的活動(dòng)，或者加上一些滿減券，能勉強(qiáng)接近1300+，覺得偏高可以選擇M6+，當(dāng)然如果你有好的渠道，那就更好四、五糧液·1618普五我不說你也知道的，千元酒的王中王，送禮或自飲都是極好的。普五和1618的價(jià)格很接近，市場價(jià)普五還要貴幾十塊，但是要知道官方定價(jià)上1618是比普五高的，但普五賣得比1618貴，原因就是普五實(shí)在太經(jīng)典了，辨識度更高。1618和普五的區(qū)別在，普五香氣沖擊力更強(qiáng)，更清新，1618偏內(nèi)斂，而且老窖復(fù)合香和陳香比較突出。第八代普五相比起七代加強(qiáng)了口感柔順度，因此在柔順方面八代普五要比1618好點(diǎn)，但香氣方面比起1618就略顯單調(diào)，總之1618可以說略勝一籌。電商價(jià)也是非常不錯(cuò)，和實(shí)際市場價(jià)相差無幾，不用等活動(dòng)和領(lǐng)什么亂七八糟的劵，可以說是非常良心了。五、汾酒·青花30復(fù)興版這個(gè)酒可以視為是青花30的新款替代酒，據(jù)說舊版青花30已經(jīng)逐漸停產(chǎn)。以前的青花30價(jià)格很混亂，不同渠道的價(jià)格差距很大，而且漲價(jià)速度飛快，一年就漲幾百塊，我上年才看到青花30是500多的價(jià)，現(xiàn)在都要800多了。復(fù)興版和舊版的價(jià)格差別很小，大概是100左右，酒質(zhì)上也比較接近，唯一的不同是復(fù)興版明顯陳味更多了點(diǎn)，回味長了，以往清香型酒就是一清到底，回味不夠是被人詬病不夠檔次原因，復(fù)興版的酒體設(shè)計(jì)無疑更符合高端品味。六、習(xí)酒·君品文武雙全的一款酒， 顏值很高，酒質(zhì)能打，可以說是習(xí)10停產(chǎn)之后的替代品吧，習(xí)酒和茅系酒可以說是一家人，同樣屬于茅臺集團(tuán)旗下，但是風(fēng)格的區(qū)別是明顯的，君品習(xí)酒相比茅臺要清新很多，連綿度不算長，偏甜柔，收口較快，比較適合接觸醬酒時(shí)間不長的酒友。七、郎酒·青花郎號稱中國第二大醬酒，如果茅臺是典雅，那青花郎就是優(yōu)雅，兩者的風(fēng)格相差也是比較明顯，明顯的茅臺更突出一種類似巧克力的焦糊香，青花郎既擁有傳統(tǒng)醬香的風(fēng)格，更擁有一絲濃香酒的窖底香。與君品突出的清新、甜柔不同的是，青花郎突出的是連綿、厚重感。八、酒鬼酒·內(nèi)參馥郁香型，在湖南擁有非常高的知名度，這幾年在全國發(fā)展得也比較快，可以說是個(gè)潛力股。何為馥郁香，意思就是包含了濃、醬、清三香，前濃、中清、后醬，但這酒明顯濃香占大頭，一直貫徹到后段還有絲絲濃香的醇甜味。風(fēng)格獨(dú)特的奧秘在于運(yùn)用小曲糖化、大曲發(fā)酵的工藝，與其他酒只用一種曲的做法，這是比較非主流的一種工藝。曾經(jīng)酒鬼酒因?yàn)槌舐勓傺僖幌?，自從推出?nèi)參后迎來口碑反轉(zhuǎn)，由于這酒風(fēng)格比較特別，所以很難找到參照物可以對比。如果硬要對比的話，可以對比一下五糧液，這酒在柔和、醇甜，爆香方面不如五糧液，但是在連綿度、回味勝于五糧液，滋味濃郁度也勝于五糧液。精力有限，還有更多高性價(jià)比的美酒就不一一推薦了，有些500塊甚至可以媲美上千塊的名酒，因?yàn)槠放浦炔桓?，有的人處于送禮考慮未必會選擇。

拿什么拯救你，妙香扁食！ 妙香扁食作為老字號的名小吃，曾經(jīng)紅紅火火，享譽(yù)廈門， 02年就榮獲中國飯店協(xié)會授予的“中華名小吃”稱號。然而現(xiàn)在的妙香，卻已難現(xiàn)往日輝煌，每況愈下，正在勉強(qiáng)支撐，慘淡經(jīng)營中。。。每次經(jīng)過妙香扁食店，看著里面空蕩蕩的店堂，服務(wù)員都趴在桌子上打瞌睡，不免令人扼腕嘆息，看著這樣一個(gè)本土品牌的日漸沒落，作為每個(gè)熱愛廈門的食客，都會覺得非?？上?。我覺得妙香扁食沒落的根本原因在于缺乏創(chuàng)新，很多問題沒有及時(shí)解決，才會造成大量顧客的流失。麥當(dāng)勞、肯德基為什么能做世界連鎖，百年品牌？原因當(dāng)然很多，但是很重要的一個(gè)原因，就是他們一直在創(chuàng)新。 首先是產(chǎn)品缺乏創(chuàng)新。這么多年來，從來沒有見過妙香扁食有過任何的變化。7，8年前就是扁食、拌面、肉粽、咸飯，現(xiàn)在還是一直扁食、拌面、肉粽、咸飯，這是產(chǎn)品缺乏創(chuàng)新。不但沒有創(chuàng)新，而且口味越來越難吃了，比如作為主打產(chǎn)品的扁食，湯比白開水還清，人家的扁食很早就開始用大骨湯做底了，妙香還一直在用清湯扔幾顆咸菜做底。麥當(dāng)勞、肯德基就經(jīng)常定期推出各種新口味、新品種，再輔以各種廣告宣稱，不斷讓消費(fèi)者保持新鮮感，吸引更多的人群。 二。服務(wù)缺乏創(chuàng)新。妙香扁食工作人員的服務(wù)態(tài)度普遍很差，是人所共知的。我們也理解那些服務(wù)員，一個(gè)月拿幾百塊錢工資，還要一天干十來個(gè)小時(shí)，誰有積極性？服務(wù)員的抱怨也許能招來個(gè)別熟客一時(shí)的理解和同情，但是卻導(dǎo)致更多消費(fèi)者的離開。所以，一定要采取措施，擺脫惡性循環(huán)，比如：加強(qiáng)對服務(wù)員的培訓(xùn)，根據(jù)經(jīng)營效益考核工資獎(jiǎng)金等，提高員工的福利待遇。 三。亟需改善衛(wèi)生環(huán)境條件。作為小吃店，衛(wèi)生環(huán)境條件是最最重要的，不少消費(fèi)者反應(yīng)過妙香的衛(wèi)生條件很差，比如在食物中發(fā)現(xiàn)臟東西等。夏天的時(shí)候，經(jīng)常看到妙香的服務(wù)員拿個(gè)蒼蠅拍在那里打蒼蠅。試想如果你是食客，別人拿個(gè)蒼蠅拍在你旁邊噼噼啪啪打蒼蠅，你還有食欲么？所以一定要提前做好衛(wèi)生條件，不要等蒼蠅來了再去趕，那樣趕走的不是蒼蠅，而是消費(fèi)者。 四。亟需進(jìn)行經(jīng)營管理方面的創(chuàng)新。比如：對員工的管理，促銷宣傳上的管理，門店的現(xiàn)場管理等等方面。這些涉及的專業(yè)內(nèi)容比較多，不一一細(xì)說了。這么多年來，你見過妙香扁食的一次宣傳促銷活動(dòng)么？ 當(dāng)然，妙香扁食還是有一些優(yōu)點(diǎn)值得繼續(xù)發(fā)揚(yáng)光大的，比如價(jià)格便宜實(shí)惠，銷售方式靈活，扁食可以外賣帶回家自己煮等。我相信，只要妙香扁食的管理層找準(zhǔn)市場定位，加大力度進(jìn)行改革創(chuàng)新，是可以重塑往日輝煌形象的。

半定量pcr內(nèi)參基因擴(kuò)增條件和目的基因擴(kuò)增條件一樣以參照物為標(biāo)準(zhǔn),對PCR終產(chǎn)物進(jìn)行分析或?qū)CR過程進(jìn)行監(jiān)測,從而達(dá)到評估樣本 中靶基因的拷貝數(shù),稱為定量PCR.根據(jù)反應(yīng)體系是否設(shè)有參照物以及是否與標(biāo)本在同一管中進(jìn)行擴(kuò)增,定量PCR可分為四種：①有限稀釋法,即倍比稀釋法：通過稀釋陽性樣品直至靶基因不能再擴(kuò)增為止,來設(shè)置已知濃度的參照品；根據(jù)陽性結(jié)果的最大稀釋度及內(nèi)參標(biāo)或外參標(biāo)的極限檢出底線,計(jì)算出待檢標(biāo)本中原始模 板的分子數(shù)；利用最大稀釋度來進(jìn)行標(biāo)本核酸定量時(shí)的注意點(diǎn).優(yōu)點(diǎn)是不需要特殊設(shè)備,缺點(diǎn)是擴(kuò)增反應(yīng)條件要標(biāo)準(zhǔn)化,嚴(yán)格注意污染,避免假陽性的產(chǎn)生.②使用 外參照物的定量PCR,以已知濃度的目的基因?yàn)槟０?按一定的倍比稀釋,然后做出標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,未知的標(biāo)本按這標(biāo)準(zhǔn)曲線找出對應(yīng)的拷貝數(shù).熒光定量PCR通 常使用該法做標(biāo)準(zhǔn)曲線.③使用非競爭性內(nèi)參照物的定量：PCR反應(yīng)條件同樣,在同一試管內(nèi),用兩對引物,同步擴(kuò)增來自同一DNA的一段靶序列和另一段內(nèi)標(biāo) 序列.通過比較兩種序列的擴(kuò)增產(chǎn)量可對靶序列定量.方法A、設(shè)計(jì)并合成PCR擴(kuò)增靶基因及無關(guān)基因的引物,優(yōu)化引物配比的條件.方法B、在指數(shù)增長期實(shí)現(xiàn) 對靶基因及一系列已知含量無關(guān)基因的PCR擴(kuò)增.方法C、PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳,EB 染色.方法D、電泳條帶的紫外光下分析.方法E、二者熒光強(qiáng)度相等管的DNA含量亦相等.該方法只有當(dāng)靶序列和內(nèi)標(biāo)序列以相同的量存在時(shí),才能對兩者相對 定量；也是對處于擴(kuò)增指數(shù)期的PCR產(chǎn)物定量.④使用競爭性內(nèi)參照物的定量PCR：同樣的反應(yīng)條件,同一個(gè)試管,用同一對引物,同步擴(kuò)增靶序列和內(nèi)參照序 列.靶基因的量可通基本條件是靶序列和競爭性序列均用相同的引物以相同的效率擴(kuò)增,兩序列的初始化比值在整個(gè)反應(yīng)過程中保持不變.目的DNA 內(nèi)參照DNA 變性（同一對引物）PCR競爭性模板的設(shè)置：通過改變克隆的靶基因的序列來設(shè)計(jì)競爭性模板插入新的限制性酶切位點(diǎn)或使原來的酶切位點(diǎn)缺失通過基因重組技術(shù) 插入一個(gè)與特異性蛋白結(jié)合的DNA片段,或者使靶序列發(fā)生定點(diǎn)誘變?nèi)斯ず铣筛偁幮阅０?競爭性模板設(shè)計(jì)目的：使其與靶基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物相區(qū)別（通過酶 切、雜交、顯色等手段實(shí)現(xiàn)）.常用的熒光定量為TaqMan探針技術(shù),他特異的和目的片段結(jié)合,只是用的是TaqMan.半定量RT-PCR用做內(nèi)參照,也應(yīng)該是第三種,只是它是普通PCR,通過電泳的條帶強(qiáng)弱,與GAPDH的比值,分析他們的灰度值半定量,個(gè)人認(rèn)為數(shù)據(jù)不可靠,應(yīng)該用TaqMan做相對 定量或絕對定量.用rt-pcr比較兩株細(xì)胞表達(dá)量的差異的時(shí)候,不一定要把兩株細(xì)胞調(diào)整為相同濃度,因?yàn)橐鰞?nèi)參照,可以校正模板量的差異

一般要求一樣，因?yàn)橐阶鰧?shí)驗(yàn)!內(nèi)參比較好P，所以以目的基因?yàn)橹鳎?/div>