1. 伊紅美藍
伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基用以鑒別大腸桿菌和沙門氏菌。培養(yǎng)基中,伊紅與美藍為指示劑,做成的培養(yǎng)基呈淡紫色。大腸桿菌能分解培養(yǎng)基中的乳糖而產(chǎn)生酸,能使伊紅與美藍結(jié)合成黑色化合物,有時還帶有熒光,沙門氏菌不能分解乳糖,故菌落顏色與培養(yǎng)基相同,伊紅與美藍還有抑制革蘭氏陽性菌生長的作用。
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基主要通過乳糖發(fā)酵鑒別腸道致病菌,還能抑制革蘭氏陽性菌生長,發(fā)酵乳糖的細菌能使培養(yǎng)基變紅,這是因為細菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基的PH植變成酸性的。
不發(fā)酵乳糖的細菌沒有顏色的變化。
用于腸道致病菌的分離培養(yǎng)
2. 伊紅美藍瓊脂
有幾個意思EMB,嵌入式系統(tǒng)簡稱。 EMB,伊紅美藍瓊脂平板。 EMB, 由巴西生產(chǎn)的系列支線飛機產(chǎn)品. EMB,electromechanical brake,電子機械制動 EMB=ethambutol,乙胺丁醇
3. 伊紅美藍培養(yǎng)基
EMB瓊脂培養(yǎng)基 EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無機鹽、0.04%的伊紅Y、0.0065%的美藍和供作試驗的糖。常用于食品、乳制品、水源和病源標本中的革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑒別。
4. 伊紅美藍的作用
瑞特(Wright)染色法:為發(fā)觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),識別各種細胞及其異常變化,血涂片必須嘲行染色。血涂片的各種染色方法大多是羅氏染色法衍變來的。目前常用瑞特染色法。
(1)瑞特染料是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成有復(fù)合染料。亞甲藍為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽,即氯化美藍。美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料。市售美藍中部分已被氧化為天青。伊紅通常為鈉鹽。即伊紅和伊混合后,產(chǎn)生一種憎液性膠體伊紅美藍中性沉淀,即瑞特染料。
(2)細胞的染色既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用,各種細胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各種不同的色彩,例如血紅蛋白,嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結(jié)合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
(3)PH對細胞染色有影響。細胞各種成分均不蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增多,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負電荷增多,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理易與美藍或天青結(jié)合,染色偏藍。因此細胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致各種細胞染色反應(yīng)異常,以致識別困難,甚至造成錯誤。
5. 伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基
平板劃線法分離菌種實驗步驟
1、融化培養(yǎng)基將裝有伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基的三角瓶放入熱水浴中加熱至沸,直至充分融化。
2、倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后,按無菌操作法倒平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。 操作方法:右手持盛培養(yǎng)基的三角瓶置火焰旁邊,用右手手掌和小指將瓶塞輕輕地撥出,瓶口保持對著火焰;然后左手拿培養(yǎng)皿并將皿蓋在火焰附近打開一條稍大于瓶口的縫隙,迅速倒入培養(yǎng)基約15ml,加蓋后輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基均勻分布在培養(yǎng)皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即為平板。
3、作分區(qū)標志(操作熟練后此步驟可省略) 在皿底用記號劃分成4個不同面積的區(qū)域,使A
6. 伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌的原理
因為SS培養(yǎng)基中含有乳糖,大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變紅色。
大腸桿菌在SS培養(yǎng)基的特征,具體體現(xiàn)在以下幾個方面:
第一、大腸桿菌在SS培養(yǎng)基,其菌落的特征一般情況下菌落的形態(tài)為乳白色,而且表面較光滑,呈圓形的菌落,邊緣較為整齊。
第二、大腸桿菌為革蘭氏短桿菌,一般呈中等大小,周身有鞭毛能夠運動,無芽孢。
第三、大腸桿菌體染色后一般為紅色,單個存在,形態(tài)為短小的桿狀。
第四、大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上,表現(xiàn)為深紫黑色、濕潤光滑,帶有金屬光澤的圓形菌落。
7. 伊紅美藍鑒別大腸桿菌顏色變化
大腸桿菌是人和許多動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細菌,周身鞭毛,能運動,無芽孢。主要生活在大腸內(nèi)。
1、大腸桿菌是細菌,屬于原核生物;具有由肽聚糖組成的細胞壁醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng),只含有核糖體簡單的細胞器,沒有細胞核有擬核;細胞質(zhì)中的質(zhì)粒常用作基因工程中的運載體。
2.大腸桿菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。
3.人體與大腸桿菌的關(guān)系:在不致病的情況下(正常狀況下),可認為是互利共生(一般高中階段認為是這種關(guān)系);在致病的情況下,可認為是寄生。
4.在培養(yǎng)基培養(yǎng)時無需添加生長因子,向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍遇大腸桿菌,菌落呈深紫色,并有金屬光澤,可鑒別大腸桿菌是否存在。
5.大腸桿菌在生物技術(shù)中的應(yīng)用:大腸桿菌作為外源基因表達的宿主,遺傳背景清楚,技術(shù)操作簡單,培養(yǎng)條件簡單,大規(guī)模發(fā)酵經(jīng)濟,倍受遺傳工程專家的重視。目前大腸桿菌是應(yīng)用最廣泛,最成功的表達體系,常做高效表達的首選體系。
6.大腸桿菌在生態(tài)系統(tǒng)中的地位,假如它生活在大腸內(nèi),屬于消費者,假如生活在體外則屬于分解者。
7.它的基因組DNA為擬核中的一個環(huán)狀分子。同時可以有多個環(huán)狀質(zhì)粒DNA.
8.大腸桿菌細胞的擬核有1個DNA分子,長度約為4 700 000個堿基對,在DNA分子上分布著大約4 400個基因,每個基因的平均長度約為1 000個堿基對。
8. 伊紅美藍培養(yǎng)基屬于
EMB培養(yǎng)基 EMB是伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。
其配方為:
成分:蛋白胨10g 乳糖 10g K2HPO4 2g 2%伊紅Y水溶液 20ml 0.5%美藍水溶液13ml pH 7.4
溶于1L水中,滅菌待用。
9. 伊紅美藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌
鑒別、培養(yǎng)大腸桿菌可使用伊紅-美藍培養(yǎng)基,菌落呈黑色或紫黑色有金屬光澤.微生物的營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機鹽等.細胞分裂素屬于植物激素. 大腸桿菌屬于原核生物的細菌,其培養(yǎng)基的基本成分有碳源、氮源水和無機鹽;細胞分裂素屬于植物激素,可以添加在植物組織培養(yǎng)時的MS培養(yǎng)基中,培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基不能添加細胞分裂素.
10. 伊紅美藍染色
HE染色也稱蘇木精-伊紅染色,是常規(guī)染色。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。 Wright stain 又稱“美藍伊紅染色法”。為檢查白細胞及瘧原蟲的常用染色法。
11. 伊紅美藍培養(yǎng)基名詞解釋
EMB瓊脂培養(yǎng)基: EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無機鹽、0.04%的伊紅Y、0.0065%的美藍和供作試驗的糖。常用于食品、乳制品、水源和病源標本中的革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑒別。